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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3272
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-15
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3272 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
節(jié)菱孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Arthrinium spp. | LZR3272 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
RisungbinellaFABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit拉丁屬名: Risungbinella pyongyangensis
枯草芽孢桿菌枯草亞種VEGFR1/FLT1 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
鏈格孢ET (Epitestosterone) ELISA Kit拉丁屬名: Alternaria Alternata
灰藍(lán)毛霉PKM2 (Pyruvate Kinase, Muscle) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor griseo
草假單胞菌PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas graminis
異常漢遜酵母異常變種PDHα (Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala
黃柄曲霉PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus flavipes
毛殼(菌)科PDP (Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
腫紅皮孔菌VIM (Vimentin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母VTN (Vitronectin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
梨形卷枝霉PPOX (Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit拉丁屬名: Helicostylum piriforme
裂孔平伏菌PRB1 (Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
海洋桿菌FOXC1 (Forkhead Box Protein C1) ELISA Kit拉丁屬名: Pontibacter sp.
嗜堿假單胞菌FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas alcaliphila
高加索鏈霉菌FOXO2 (Forkhead Box Protein O2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces ciscaucasicus
節(jié)菱孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Alpha-Synuclein 核突觸蛋白（抗原）球松素查爾酮1-(2,6-Dihydroxy-4-methoxyphenyl)-3-phenylprop-2-en-1-one對(duì)照藥材 分 子 式: C16H14O4 分 子 量: 270.27996
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白（抗原）蘇丹紅ⅡSudan II中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H16N2O 分 子 量: 276.33
CA15-3 peptide 相關(guān)抗原抗原圓錐定 A1H-Indole-3-butanoic acid,R-methyl-,methyl ester,(RR)- 對(duì)照藥材 分 子 式: 分 子 量:
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體（抗原）五-O-乙?；?β-D-吡喃葡萄糖beta-D-Glucose pentaacetate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H22O11 分 子 量: 390.33928
p-Caldesmon(phosphor-Ser789) 磷酸化鈣介質(zhì)素抗原原兒茶醛3,4-Dihydroxybenzaldehyde中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H6O3 分 子 量: 138.12074
NK-2R peptide 神經(jīng)激肽A受體（多肽抗原）6''-丙二酸沙苑子苷單酯中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
Calpain 1 鈣蛋白酶（多肽）沙紙寧CPhenol,2-[3-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)- propyl]-5-methoxy- 對(duì)照藥材 分 子 式: C17H20O4 分 子 量: 288.3383
