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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
糞產堿桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3253
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-01-15
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3253
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

糞產堿桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

Alcaligenes faecalis

LZR3253


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

新疆溶桿菌COL6 (Collagen Type VI) ELISA Kit拉丁屬名: Lysobacter xinjiangensis

黑木耳COL1α2 (Collagen Type I Alpha 2) ELISA Kit  用途: 食用、藥用

擬青霉COL2α1 (Collagen Type II Alpha 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

堅強芽孢桿菌COL3α1 (Collagen Type III Alpha 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

皺環球蓋菇COL4α1 (Collagen Type IV Alpha 1) ELISA Kit 用途: 試驗栽培

米蘭鏈霉菌COL6α1 (Collagen Type VI Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces mediolani

規則東方喜鹽菌COL7 (Collagen Type VII) ELISA Kit 拉丁屬名: Halorientalis regularis

枯草芽孢桿菌COL8α1 (Collagen Type VIII Alpha 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

白酒   COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit 拉丁屬名: 白酒  鉛

釀酒酵母COL11α1 (Collagen Type XI Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

玫瑰淡紫鏈霉菌COL17 (Collagen Type XVII) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces roseolilacinus

黑色淺灰鏈霉菌Collagenase I ELISA Kit用途: 代謝產物具有活性及殺蟲活性。

弗吉尼亞鏈霉菌Collagenase II ELISA Kit用途: 拮抗菌

鐮刀菌NPYR1 (Neuropeptide Y Receptor Y1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

根瘤菌CLL1 (Collectin Liver 1) ELISA Kit用途: 固氮
糞產堿桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 APC(Activated protein C)  APC活化蛋白C抗原二氫姜黃素Dihydrocurcumin中藥標準品  分 子 式: C21H21NO5 分 子 量: 367.39514

Apelin  脂肪因子Apelin抗原對羥基苯乙酸2-(4-Hydroxyphenyl)acetic acid對照藥材 分 子 式: C8H8O3 分 子 量: 152.14732

Apelin receptor/APJ receptor   Apelin receptor抗原光翠雀堿denudatine中藥標準品  分 子 式: C22H33NO2 分 子 量: 343.50292

APG4B/AUTL1  APG4B細胞自噬相關抗原刺桐酚素6H-Benzofuro[3,2-c][1]benzopyran-3,6a(11aH)-diol,9-methoxy-10-(3-methyl-2-buten-1-yl)-, (6aS,11aS)-對照藥材 分 子 式: C21H22O5 分 子 量: 354.39638

apoA1 (Apolipoprotein/APOA1 protein )human  載脂蛋白A1抗原蔗糖咪唑溶液(0.4mol/L,pH7.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J)  凝聚素α/β抗原柴胡皂苷FSaikosaponin F中藥標準品  分 子 式: C48H80O17 分 子 量: 929.138600000001

Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha)  受體-α(抗原)強磷酸鹽緩沖液(PBS,pH7.2)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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