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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3284
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-15
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3284 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
禽類支原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Avian Mycoplasma spp. | LZR3284 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
香菇SPARC (Secreted Protein Acidic And Rich In Cysteine) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
異常威克漢姆酵母LRG1 (Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
產(chǎn)色鏈霉菌REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces chromogenes
地中海擬無枝酸菌S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit拉丁屬名: Amycolatopsis mediterranei
柔薄迷孔菌S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
齒被栓菌GPR37 (G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit拉丁屬名: Trametopsis cervina
出芽短梗霉S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit 拉丁屬名: Aureobasidium pullulans
枯草芽孢桿菌S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
小孢根霉塊狀變種S100A13 (S100 Calcium Binding Protein A13) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. tuberosus
中慢生華癸根瘤菌S100A6 (S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit 用途: 與沙打旺、斜莖黃芪共生固氮
鈉線菌屬S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit拉丁屬名: Natrinema sp.
產(chǎn)氨短桿菌S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 拉丁屬名: Brevibacterium ammoniagenes
弗吉尼亞鏈霉菌SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces virginiae
pLKO.1-puroSCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: 宿主：Ecoli.stbl3
禽類支原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗原Tris-HCl緩沖液(0.05mol/L,pH7.0-9.0,無菌)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CD146/MCAM 細胞粘附分子CD146抗原Acr-Bis(30%:0.8%)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原DNA退火緩沖液(5×)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內(nèi)毒素受體抗原當歸堿5H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-5-one,2,3- dihydro-4-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-2-(1- hydroxy-1-methylethyl)-,(2S)- 對照藥材 分 子 式: C15H16O6 分 子 量: 292.28394
CD28 CD28抗原二氫辣椒素酯Nonanoic acid,8-methyl-, (4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl ester中藥標準品 分 子 式: C18H28O4 分 子 量: 308.41252
CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化白細胞粘附分子抗原多菌靈1H-Benzimidazole-2-carbamic acid methyl ester植物激素及核酸類 分 子 式: C9H9N3O2 分 子 量: 191.18666
CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細胞抗原CD177抗原8-香葉草氧基補骨脂素9-((3,7-Dimethylocta-2,6-dien-1-yl)oxy)-7H-furo[3,2-g]chromen-7-one中藥標準品 分 子 式: C21H22O4 分 子 量: 338.39698
