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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3267
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-15
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3267 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
侵入性絲囊霉菌（綜合癥病原）探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Aphanomyces invadans | LZR3267 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
蠟樣芽孢桿菌β-Glu (Beta Glucosidase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
板栗蛇孢日規(guī)殼IRAK3 (Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Ophiognomonia castanea
高加索異常倚囊霉GUSβ (β-glucuronidase) ELISA Kit拉丁屬名: Pilaira caucasica
外來毛霉橙色變種SYCN (Syncollin) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor adventitius var. aurantiacus
累四菲鏈霉菌TUBβ (β-Tubulin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鞘氨桿菌屬β-TG (β-Thromboglobulin) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingobacterium sp.
三葉草根瘤菌MIγ/CXCL9 (Monocyte Interferon Gamma Inducing Factor) ELISA Kit用途: 與白三葉草共生固氮
谷氨酸棒桿菌γ-ECS (γ-Glutamyl Systeine Synthetase) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
黃灰鏈霉菌PLA2G10 (Phospholipase A2, Group X) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces flavogriseus
云芝栓孔菌（變色栓菌）γGT1 (Gamma Glutamyltransferase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes versicolor
鐘器腐霉POMC (Pro-Opiomelanocortin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黑曲霉OXA (Orexin A) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
頭孢屬PIK3Cβ (Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Beta Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Cephalosporium sp.
類諾卡氏菌OIT3 (Oncoprotein Induced Transcript 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardioides sp.
點枝頂孢PIK3Cσ (Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Delta Polypeptide) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
侵入性絲囊霉菌（綜合癥病原）探針法熒光定量PCR試劑盒說明書PDGF-A 血小板源性生長因子-1（抗原）洋艾素2H-7,13b-Ethenopentaleno[1'',2'':6,7;5'',4'':6',7']dicyclohepta[1,2-b:1',2'-b']difuran-2,12(11H)-dione,3,3a,4,5,6,6a,6b,7,7a,8,9,10,10a,13a,13c,14b-hexadecahydro-6,8-dihydroxy-3,6,8,11,14,15-hexamethyl-,(3S,3aS,6S,6aR,6bS,7S,7aR,8S,10aS,11S,13aS,13bR,13cR,14bS)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H40O6 分 子 量: 496.635
PDGF-B 血小板源性生長因子-B（抗原）三七皂苷T5Notoginsenoside T5化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
PDGF-R-A 血小板源性生長因子受體-A（抗原）TEMED標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
PDGF-R-B 血小板源性生長因子受體-B（抗原）三七皂苷R1netoginsenoside R1中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C47H80O18 分 子 量: 933.127300000001
PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽9-甲氧基鐵屎米酮6H-Indolo[3,2,1-de][1,5]naphthyridin-6-one,9-methoxy-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H10N2O2 分 子 量: 250.2521
PI3K 磷脂酰肌醇激酶（抗原）磷酸酶抑制劑(50×)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4（抗原）重樓皂苷IIPolyphyllin II中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C44H70O16 分 子 量: 855.017000000001
