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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
自養(yǎng)無枝酸菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3259
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-01-15
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3259
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

自養(yǎng)無枝酸菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Amycolata autotrophica

LZR3259

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

毛栓孔菌COL13 (Collagen Type XIII) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes hirsuta

北京棒桿菌COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  pekinense

洋蔥假單胞菌CTX-III (Cross Linked C-telopeptide of Type III Collagen) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  cepacia

糞銹傘EJ/GlyRS (Anti-EJ-Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

印度拜葉林克氏菌EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母SELE (E-Selectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

毛榛畢赤酵母F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia mandshurica

戊糖乳桿菌Flt3 (FMS Like Tyrosine Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus pentosus

7#---2號(網(wǎng)紋馬勃)GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

木霉GATA2 (GATA Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma sp.

溶桿菌GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Lysobacter  sp.

白金針菇—2號GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

楊爛皮殼蕉孢菌GATA5 (GATA Binding Protein 5) ELISA Kit 用途: 植物病原物,用于該菌種群遺傳學(xué)研究;為該病防治提供依據(jù)

香菇GDI1 (GDP Dissociation Inhibitor 1) ELISA Kit 用途: 試驗栽培

間座殼GAP (GTPase Activating Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
自養(yǎng)無枝酸菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書neurofasciu-155  神經(jīng)束蛋白-155Acr-Bis(40%,37.5:1)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

NGF- Beta  神經(jīng)生長因子-β(多肽片斷抗原)新夏佛托苷5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl]-8-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-trihydroxytetrahydro-2H-pyran-2-yl]-4H-chromen-4-one (non-preferred name)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C26H28O14 分 子 量: 564.4921

Ang I/AT1(Angiotensin I)  緊張素I抗原仙鶴草酚B1-Butanone,1-[3,5-bis[[2,6-dihydroxy-4-methoxy-3-methyl-5-(1-oxobutyl)phenyl]methyl]-2,4,6-trihydroxyphenyl]-2-methyl-,(2S)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C37H46O12 分 子 量:

NGF-R(p75NTR)  神經(jīng)生長因子受體(抗原)多被銀蓮花皂苷R8Raddeanoside R8中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C65H106O30 分 子 量: 1366

AT1R(Angiotensin II Type 1 Receptor)  緊張素Ⅱ-1型受體抗原鳶尾酚酮Iriflophenone對照藥材 分 子 式: C13H10O5 分 子 量: 246.2155

AT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor)  緊張素Ⅱ-1型受體抗原三七素(S)-2-Amino-3-(carboxyformamido)propanoic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C5H8N2O5 分 子 量: 176.12742

NIK,NF-kappaB-Inducing Kinase  NFkB誘導(dǎo)的激酶(抗原)鈉單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(200ug/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: 


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