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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

異常畢赤酵母HELIX-Ⅱ(Type Ⅱ Collagen Helical Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia anomala

釀酒酵母HMGCS1 (3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-Coenzyme A Synthase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

利尻鏈霉菌PⅢCP (Procollagen Ⅲ C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

大腸埃希氏菌DKK4 (Dickkopf Related Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

果生鏈核盤菌LDH (Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

膨大彎頸霉MTHFR (Methylenetetrahydrofolate Reductase) ELISA Kit拉丁屬名: Tolypocladium inflatum

中孢短芽孢桿菌PRKAα1 (Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Brevibacillus centrosporus

類志賀鄰單胞菌NFKBIE (Nuclear Factor Of Kappa Light Polypeptide Gene Enhancer In B-cells Inhibitor Epsilon) ELISA Kit拉丁屬名: Plesiomonas shigelloides

類干酪乳桿菌類干酪亞種PTPRB (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type B ) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  paracasei subsp. paracasei

綠色鏈霉菌BF (Factor B) ELISA Kit用途: 分類

大豆根瘤菌CREB (Cyclic AMP Response Element Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bradyrhizobium japonicum (Kirchner) Jordan

羽扇豆根瘤菌CPP (Copeptin) ELISA Kit用途: 模式菌株

黃曲霉CLDN11 (Claudin 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus flavus

綠色木霉CXCR1 (CXC-Chemokine Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma  viride

美澳型核果褐腐病菌CXCR3 (Chemokine CXC Receptor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Monilinia fructicola
鵝裂口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 Melan-A/MART-1  黑色素-A（抗原）磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液(pH2.2-8.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ARIP2a(Activin receptor 2A)  激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原槐黃烷酮C4H-1-Benzopyran-4-one,2-(2,4-dihydroxyphenyl)-8-[(2E)-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl]-2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-,(2S)-化學標準品 分 子 式: C25H28O6 分 子 量:

Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2)  β-抑制蛋白1/2抗原28-去甲基-β-香樹脂酮28-norolean-12-en-3-one中藥標準品  分 子 式: C29H46O 分 子 量: 410.675

ARIP2B(Activin receptor 2B)  激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體異銀杏雙黃酮Isoginkgetin中藥標準品  分 子 式: C32H22O10 分 子 量: 566.51108

MTR-1A (Melatonin receptor-1A)  褪黑素受體（抗原）3,3'-O-二甲基鞣花酸3,3’-Di-O-methylellagic acid中藥標準品  分 子 式: C16H10O8 分 子 量: 330.2458

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱：MYC  致癌基因（抗原）青陽參苷元APregn-5-en-20-one,3-[(O-2,6-dideoxy-3-O-methyl-b-D-arabino-hexopyranosyl-(1®4)-O-2,6-dideoxy-3-O-methyl-b-D-ribo-hexopyranosyl-(1®4)-2,6-dideoxy-3-O-methyl-b-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]-8,14,17-trihydroxy-12-[(4-hydroxybenzoyl)oxy]-,(3b,12b,14b,17a)- (9CI)中藥標準品  分 子 式: C49H72O17 分 子 量:

N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1)  核受體輔助抑制因子（抗原）苦瓜皂苷 PMomordicoside P化學標準品 分 子 式:  分 子 量: