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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3248
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-15
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3248 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
阿菲波菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Afipia spp. | LZR3248 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
黑曲霉CENPB (Centromere Protein B) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
蘋果黑腐皮殼CEP110 (Centrosomal Protein 110kDa) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
茄鏈格孢菌CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
根瘤菌CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit用途: 與紫穗槐共生固氮
三葉草根瘤菌V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog (FOS) ELISA Kit用途: 與白三葉草共生固氮
平菇MUC21 (Mucin 21) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希氏菌CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
雞傷寒沙門氏菌CHEM(Chemerin) ELISA Kit 拉丁屬名: gallinarum
貝葉多孔菌CCL1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit用途: 食用兼藥用
樟疫霉CCL14 (Chemokine C-C-Motif Ligand 14) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鏈格孢菌CCL16 (Chemokine C-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物
白色鏈霉菌白色亞種CCL3L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces albus subsp. albus
陰溝腸桿菌CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterobacter cloacae
小孢根霉少孢變種CCR8 (Chemokine C-C-Motif Receptor 8) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. oligosporus
碳纖維單胞菌CCRL1 (Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Cellulomonas carbonis
阿菲波菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2（抗原）Delta 5-avenasterolStigmasta-5,24(28)-dien-3-ol,(3b)-化學(xué)標準品 分 子 式: C29H48O 分 子 量: 412.69082
ANP(atrial natriuretic peptide) 心鈉肽（心鈉素）抗原二氫歐山芹素columbianetin中藥標準品 分 子 式: C14H14O4 分 子 量: 246.261
GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4（抗原）柘樹口山酮 ACudratricusxanthone-A對照藥材 分 子 式: C23H24O6 分 子 量: 396.43306
GHRF (GHRH) 生長激素釋放激素（因子）（抗原）雞屎藤次苷(1S,4aS,5R,7aS)-1-(beta-D-glucopyranosyloxy)-5-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-1,4a,5,7a-tetrahydrocyclopenta[c]pyran-4-carboxylic acid化學(xué)標準品 分 子 式: C16H22O11 分 子 量: 390.33928
ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 位蛋白樣1/生成素樣蛋白-1抗原核酸助沉劑(Glycogen,20mg/ml)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GLUT4(Glucose transporter type 4) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（抗原）1-乙氧基羰基-beta-咔啉9H-Pyrido[3,4-b]indole-1-carboxylic acid ethyl ester化學(xué)標準品 分 子 式: C14H12N2O2 分 子 量: 240.25728
GIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽（抗原）花椒堿Fagarine對照藥材 分 子 式: C13H11NO3 分 子 量: 229.23134
