- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3224
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-10
- 更新日期: 2025-01-15
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3224 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬胸膜放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Actinobacillus pleuropneumoniae | LZR3224 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
不動桿菌屬ACA-IgG (Anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter sp.
爪哇根霉ACA-IgM (Anti-Cardiolipin Antibody IgM) ELISA Kit用途: 產(chǎn)延胡索酸、蘋果酸
釀酒酵母ACD (Adrenocortical Dysplasia Homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
畢赤酵母ACH (Acetylcholine) ELISA Kit用途: 表達甘露聚糖酶,應用于飼料工業(yè)
鴨疫里氏桿菌AChE (Acetylcholinesterase) ELISA Kit拉丁屬名: anatipestifer
燼灰紅鏈霉菌燼灰紅亞種AChRab (Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces cinereoruber subsp. cinereoruber
偽病毒ACO-2 (Aconitase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudorabies virus
運動節(jié)桿菌IL-18 (Interleukin 18) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter agilis
褐頂環(huán)柄菇IL-19 (Interleukin 19) ELISA Kit用途: 屬外生菌根菌
枯草芽孢桿菌ACTG1 (Actin Gamma 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
米曲霉ACTN2 (Actinin Alpha 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
赭色擲孢酵母ACTN3 (Actinin Alpha 3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
石榴嗜藍孢孔菌ACTα2 (Actin Alpha 2, Smooth Muscle) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母ACTα1 (Actin Alpha 1, Skeletal Muscle) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Atopobium vaginae ADA (Adenosine Deaminase) ELISA Kit拉丁屬名: Atopobium vaginae
豬胸膜放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor) 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原)棕矢車菊素5,7-Dihydroxy-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-6-methoxy-4H-chromen-4-one中藥標準品 分 子 式: C17H14O7 分 子 量: 330.28886
14-3-3 protein 14-3-3 蛋白(多肽抗原)Western轉(zhuǎn)移緩沖液(NC,PVDF)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
14-3-3 family protein(Malus domestica (Apple) (Malus sylvestris)) 植物14-3-3蛋白抗原大戟因子L1Euphorbia factor L1中藥標準品 分 子 式: C32H40O8 分 子 量: 552.6552
FRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白育亨賓堿yohimbine中藥標準品 分 子 式: C21H26N2O3 分 子 量: 354.45
AIF (Apoptosis-Inducing Factor) 調(diào)亡誘導因子(多肽片斷抗原)Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH8.0)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Adenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1磺胺吡啶Sulfapyridine化學標準品 分 子 式: C11H11N3O2S 分 子 量: 249.28894
Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原)茴芹內(nèi)酯5,6-Dimethoxy-2H-furo[2,3-h]chromen-2-one中藥標準品 分 子 式: C13H10O5 分 子 量: 246.2155