產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3214 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
傘枝梨頭霉探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Absidia corymbifera | LZR3214 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:
*百脈根根瘤菌EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)ELISA Kit 用途: 模式菌株
黃微綠鏈霉菌ENG (Endoglin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces flavovirens
變幻青霉ES (Endostatin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
大豆慢生根瘤菌ET-1 (Endothelin 1) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮,培養基pH4.6生長
尖鐮孢EPCR (Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit用途: 教學科研
美登木植物放線孢菌EPO (Erythropoietin) ELISA Kit 拉丁屬名: Plantactinospora mayteni
釀酒酵母FAS/CD95 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
產黃青霉FASL/TNFSF6 (Factor Related Apoptosis Ligand) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
巨獸芽孢桿菌FABP1 (Fatty Acid Binding Protein 1, Liver) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium
pETPT7αFP (Alpha-Fetoprotein) ELISA Kit用途: 表達載體
芽孢桿菌屬AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
糞腸球菌AAP (Alanine Aminopeptidase) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus faecalis
檸檬黃色農球菌FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit拉丁屬名: Agrococcus citreus
赤曲霉FGF21 (Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus ruber
灰平鏈霉菌Flt3L (FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
傘枝梨頭霉探針法熒光定量PCR試劑盒規格Streptococcus suis 2 (Cell protein) 2型豬鏈球菌菌體蛋白色胺2-(1H-Indol-3-yl)ethanamine氨基酸類 分 子 式: C10H12N2 分 子 量: 160.21568
GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)peptide 胰素樣肽-1(多肽)1-乙酰氧基-9,17-十八二烯-12,14-二炔-11,16-二醇11,16-Dihydroxyoctadeca-9,17-dien-12,14-diyn-1-yl acetate對照藥材 分 子 式: C20H28O4 分 子 量: 332.43392
ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20 Rat, human, mo, pig, dog, bov 腎上腺髓質素蛋白(N端20肽)桑辛素 T2-(3,5-dihydroxyphenyl)-5-methoxy-4-(3-methylbut-2-enyl)benzofuran-6-ol化學標準品 分 子 式: C20H20O5 分 子 量: 340.37
AGEs 晚期糖基化終末產物AGEs茶皂素Saponin脂肪酸類 分 子 式: C97H137NO17Si2 分 子 量: 1645.29318
AGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產物蛋白對照品當歸酰異五味子素OAngeloylisogomisin O中藥標準品 分 子 式: C28H34O8 分 子 量: 498.6
ET-1(Endothelin-1) 內皮素-1(蛋白多肽 活性蛋白)紋香茶菜 E1,4-Phenanthrenedione,2-[2-(acetyloxy)-1-methylethyl]-4b,5,6,7,8,8a,9,10-octahydro-3,9,10-trihydroxy-4b,8,8-trimethyl-(9CI)對照藥材 分 子 式: C22H30O7 分 子 量:
GRGDS peptide 粘附多肽GRGDSTris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE,RNase free)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: