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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
αKGDHα酮戊二酸脫氫酶測試劑盒微量法
  • 品牌:聯祖
  • 產地:國產
  • 型號:50管/48樣
  • 貨號:LZ-01568S
  • 發布日期: 2020-07-22
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 國產
品牌 聯祖
貨號 LZ-01568S
用途 公司產品僅用于科研
英文名稱
包裝規格 50管/48樣
純度 詳見說明書%
CAS編號
別名 α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)測試盒
分子式
是否進口

血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。

【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

αKGDHα酮戊二酸脫氫酶測試劑盒微量法

50/48

紫外分光光度法

LZ-01568S

商品介紹:

測定意義
TH位于線粒體的內膜上,又稱為線粒體復合體六,催化NADH+NADP+NAD++NADPH相互轉化,調節線粒體NAD(H)NADP(H)平衡。把逆向反應稱為TH-2,催化NADPHNAD+生成NADP+NADH

測定原理:

NADHNADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉氫反應不能導致340nm吸光度發生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+TH-2催化APAD+還原生成APADHAPADH375nm有特征光吸收,測定375nm光吸收的增加速率,來計算TH-2活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗通用規則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)吲哚-3-乙酸,英文名或英文縮寫:IUPAC,級別:USP級,95%,規格:1克

FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-(2-羌基)咪坐 1-(2-xy7noxyqthyl)imidczolq 1612-14-1

LX-2 人肝星形細胞三拂磺醋 McGNqSIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 60871-83-

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1枸櫞酸鐵,英文名或英文縮寫:Ammonium ferril  brown,級別:AR,98%,規格:250毫克

HCT116, 人結細胞20859-02-3L-叔亮酸L-tert-Leucine
兔源細胞 長鼻袋鼠腎細胞,Pt K1細胞 RBL-1細胞,大鼠嗜堿性粒細胞性細胞螯合瓊脂糖凝膠FF500毫克

人正常肝細胞;L-025-錄-2-磺酰錄 5-Chlorothiophqnq-2-sulfonyl chloridq 766-74-7

HA Others H16N3 甲型 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) L--谷二肽25克RT,避光

MiaPaCa-2, 人癌細胞硼砂鹽酸緩沖液,英文名或英文縮寫:Borax-xy7nochloric acid Buffer solution,級別:AR,規格:25克

CD40LG Others Mouse 小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙縮醛二乙醇Acetal
髓核細胞培養基NPCM酸性藍40(>50%,BS)Acid blue 40質量規格:>50%,BS

CST1 Others Human 人 CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸性品紅6B(>50%,BS)Acid Red 6B質量規格:>50%,BS

GPH4 豚鼠心肌來源細胞B1(>Aflatoxin B1 from Aspergillus flavus質量規格:>98%,BR

CM-M014小鼠氣管和上皮細胞完全培養基100mLB2(>Aflatoxin B2質量規格:>98%,BR

3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞G1(>Aflatoxin G1質量規格:>98%,BR
αKGDHα酮戊二酸脫氫酶測試劑盒微量法CM-H069人膀胱平滑肌細胞完全培養基100mLRIBORESERVERNASTORAGESOLUTIONRNA貯存液050MLFrozen

CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-苯基醋酸酯 4-Fluorophenyl acetate,≥97.0% 405-51-6 5G 通用試劑

人表皮色素細胞-深色素HEM-d聚-L-賴安醋輕溴醋鹽(+4°C) L-Lysinq homopolymqr xy7nobromidq 2988-63-0

Hs 683細胞,人腦視神經細胞 人癌細胞,MDA-MB-468細胞 動物上皮細胞培養基EpiCM-a1-羥基本并三氮唑一水物100毫克

大額牛肺細胞;BFR-L1128-08-5N-溴代琥珀N-Bromosuccinimide
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

聯系方式
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