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大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒48T/96T英文名稱：Rat neutrophil elastase (NE) ELISA KitELISA試劑為我司主營產品之一，產品皆嚴格按照相關標準進行 ，并經過了嚴格地反復地檢測，我們以嚴謹的態度保證產品的質量，從而保證您的實驗順利進行。產品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務。別名:大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)elisa檢測試劑盒產品規格:48T/96T。

產品名稱：大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒48T/96T

英文名稱：Rat neutrophil elastase (NE) ELISA Kit

規格 ：48T/96T

主要成分：酶標板,試劑,標準品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。產品僅用于科研例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..

實驗標準品圖：

40 ng/L，5號標準品，150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

20 ng/L，4號標準品，150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

10 ng/L，3號標準品，150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

5 ng/L，2號標準品，150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.5 ng/L，1號標準品，150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

注意事項：

1．從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3． 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔

*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請*乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物請避光保存。

7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9． 本試劑不同批號組分不得混用。

操作流程如下：

（1）產品僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。　

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。　

（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。　

（6）洗板，同（4）。　

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。　

（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。　

（9）洗板，同（4）。　

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。　

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。　

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

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