Annexin V是一種檢測細胞凋亡的試劑，在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細胞發(fā)生凋亡早期，膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V作為一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，它通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)。

      用標(biāo)記了FITC的AnnexinⅤ作為熒光探針，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生，正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的。Propidium iodide(PI)是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI能夠透過細胞膜與細胞核結(jié)合呈現(xiàn)紅色。將AnnexinⅤ與PI匹配使用，可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區(qū)分開來。

    細胞凋亡是細胞的基本特征之一，它在機體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面起著十分重要的作用。在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細胞凋亡早期，細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS高親和力特異性結(jié)合。

折疊注意事項
1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

2.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

3.Annexin V-FITC和Propidium iodide是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。

4.成功的檢測凋亡受以下幾種因素的影響，如細胞類型、細胞膜上PS的密度、發(fā)生凋亡時PS翻轉(zhuǎn)的比例、誘導(dǎo)細胞凋亡的方法、所用試劑、誘導(dǎo)凋亡的時間等，把這些影響因素進行優(yōu)化對實驗成功與否至關(guān)重要。