PLA2磷脂酶A2測試劑盒可見分光光度法操作步驟
發表時間:2023-02-09實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。
改良CCD瓊脂基礎 規格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(GB、ISO),每100mL基礎培養基需添加1支配套試劑
Bolton肉湯基礎 規格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),每100mL基礎培養基需添加1支配套試劑(SR0340)
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 滅菌后冷至45℃左右時加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養。(CP、GB、EP、USP)
Skirrow瓊脂配套試劑 規格: 10支/盒 作用: 每支添加于100mL的 Skirrow瓊脂基礎中
改良CCD瓊脂配套試劑 規格: 10支/盒 作用: 每支添加于100ml(022212)中配成MLST
Bolton肉湯配套試劑 規格: 10支/盒 作用: 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎中
水解酪蛋白胨(MH)瓊脂 規格: 250g 作用: 滅菌后冷卻至45℃左右時加入5%的脫纖維羊血,配成Mueller Hinton 血平板,用于空腸彎曲菌的藥敏試...
布氏肉湯 規格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌培養及運動性觀察。(GB、ISO)
Skirrow瓊脂 規格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(GB、ISO),每100mL基礎培養基需添加2支配套試劑。(SR0330)
改良CCD瓊脂基礎 規格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(GB、ISO),每100mL基礎培養基需添加1支配套試劑
Bolton肉湯基礎 規格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),每100mL基礎培養基需添加1支配套試劑(SR0340)
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 滅菌后冷至45℃左右時加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養。(CP、GB、EP、USP)
高氏合成1號瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 供放線菌培養用。
血平板 (成品培養基) 規格: 20個/盒 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗
哥倫比亞血平板(成品培養基) 規格: 20個/盒 作用: 用于一般病原菌的分離培養和溶血性細菌的鑒別
改良克氏雙糖培養基 規格: 250g 作用: 用于小腸結腸炎耶爾森氏菌的鑒定
硝酸鹽蛋白胨水培養基 規格: 250g 作用: 用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸鹽產氣試驗
半固體瓊脂 規格: 250g 作用: 供細菌動力觀察、菌種保存,H抗原位相變異試驗等。(美國FDA、SN、GB)
3%氯化鈉三糖鐵瓊脂 規格: 250g 作用: 用于副溶血性弧菌的生化反應。(GB、SN)
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗