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上海聯祖生物科技有限公司
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人腎素(Renin)檢測試劑盒(ELISA方法)操作程序

發表時間:2023-01-05
人腎素(Renin)檢測試劑盒(ELISA方法)操作程序:
1.已稀釋好的ABC和TMB顯色液在加入酶標板孔前都應預先在37℃中平衡至少30分鐘。試劑或樣品稀釋時,切不可忘記混勻。每次檢測都應該做標準曲線。用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當的稀釋倍數。
確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目,并增加1孔作為TMB空白顯色孔??倲?樣品數+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放入冰箱中。
2.將2000pg/ml,1000pg/ml,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.2pg/ml的標準品各100μL依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于人血清、血漿、尿液、細胞裂解液或細胞培養上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品100μL。
3.酶標板加上封板膜,37℃反應90分鐘。
4                      .反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體;或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。不洗。
5.將準備好的生物素抗人renin抗體工作液按每孔100μL依次加入(TMB空白顯色孔除外)。
6.酶標板加上封板膜,37℃反應60分鐘。
7.1X洗滌緩沖液洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右(每孔洗液至少300μL)。
8.將準備好的ABC工作液按每孔100μL依次加入(TMB空白顯色孔除外)。
9.酶標板加上封板膜,37℃反應30分鐘。
10.1X洗滌緩沖液洗滌5次,每次浸泡1~2分鐘左右(每孔洗液至少300μL)。

11.按每孔90μL依次加入已在37℃平衡30分鐘的TMB顯色液,37℃避光反應25~30分鐘。

注意:顯色時間供參考,因用戶實驗室條件差異,最佳顯色時間會有所不同。此時肉眼可見標準品的前3~4孔有明顯的梯度藍色,后3~4孔差別不明顯。
12.按每孔100μL依次加入終止液,此時藍色立轉黃色。

13.用酶標儀在450nm測定O.D.值。

14.有兩種設定空白對照的方案:
① 將TMB空白顯色孔(只加TMB顯色液和終止液)設為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去TMB空白顯色孔的吸光值后,在坐標紙上畫出曲線,以吸光值作為縱坐標,以濃度作為橫坐標。
② 將零孔設為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,得到的數據可以直接在坐標紙上畫出曲線。

根據樣品的吸光值在坐標上找出對應的濃度。用戶也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應該×N。

果糖測試盒 Fructose test case
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒 Superoxide dismutase (SOD) test kit
超氧化物歧化酶(SOD)分型測試盒 Superoxide dismutase (SOD) typing test case
黃嘌呤氧化酶(XOD)測試盒 Xanthine oxidase (XOD) test kit
丙二醛(MDA)測試盒 Malondialdehyde (MDA) test kit
微量丙二醛(MDA)測試盒 Micro malondialdehyde (MDA) test kit
谷胱甘肽-S轉移酶(GSH-ST)測試盒 Glutathione S-transferases (GSHST) test kit
谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-PX)測試盒 Glutathione peroxidase (GSH-Px) test kit
還原型谷胱甘肽(GSH)測試盒 Reduced glutathione (GSH) test kit
氧化型谷胱甘肽(GSSG)測試盒 Oxidized glutathione (GSSG) test kit
谷胱甘肽-還原酶(GR)測試盒 Glutathione reductase (GR) test kit


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