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莫氏巴貝斯蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒實驗過程
發表時間:2022-09-27
莫氏巴貝斯蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測.
去整合素樣金屬蛋白酶10抗體
含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體
含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族8抗體
植物生長激素ABP1抗體
肌動蛋白相關蛋白1抗體
α紅細胞分化相關因子抗體
血管緊張素激活蛋白1抗體
Alpha清蛋白抗體
AFAP1L2抗體
神經細胞分化相關蛋白AHNAK抗體
粘合連接相關蛋白1抗體
去整合素樣金屬蛋白酶13抗體
聚集蛋白抗體
轉錄因子AP2α+β抗體
磷酸化腺瘤樣息肉抗體
磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體
細胞周期后期促進蛋白亞基10抗體
細胞周期后期促進蛋白亞基11抗體
腺瘤性結腸息肉病蛋白2抗體
磷酸化細胞分裂周期蛋白16抗體
DNA修復酶相互作用蛋白抗體
脂肪細胞膜相關蛋白抗體
載脂蛋白A1結合蛋白抗體抗體
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復合物1抗體
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復合物2抗體
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復合物3B抗體