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人B7同系物6ELISA試劑盒間接法(檢測未知抗體)
發表時間:2022-06-01
人B7同系物6ELISA試劑盒間接法(檢測未知抗體)
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
自備的設備及試劑:
1. 450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
纖維二糖多粘菌素E(CC)瓊脂基礎凍干配套試劑
改良纖維二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)瓊脂基礎 凍干配套試劑
多粘菌素B(氯化鈉多粘菌素B肉湯凍干配套試劑)
亞碲酸鉀(慶大霉素瓊脂凍干配套試劑)
亞碲酸鉀(四號瓊脂凍干配套試劑)
改良纖維二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)瓊脂基礎
3%氯化鈉三糖鐵瓊脂
Cary-Blair氏運送培養基(不含瓊脂)
Cary-Blair氏運送培養基
氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎
60g/L氯化鈉蛋白胨水(PW)
慶大霉素瓊脂
3%氯化鈉溶液
我妻氏血瓊脂
3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂
堿性瓊脂
四號瓊脂
TCBS瓊脂
緩沖-甘油氯化鈉溶液
3%氯化鈉堿性蛋白胨水
堿性蛋白胨水
SCDLP液體培養基
營養瓊脂(普通肉湯瓊脂培養基)
含鐵牛奶培養基
亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(SPS)