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小鼠白細胞活化黏附因子ELISA試劑盒操作流程
發表時間:2022-03-14
小鼠白細胞活化黏附因子ELISA試劑盒操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
ATP5G2蛋白抗體
ATP6V0D2蛋白抗體
ATP6V1B2蛋白抗體
ATPIF1蛋白抗體
Attractin蛋白抗體
磷酸化有絲分裂激酶B抗體
肌動蛋白相關蛋白M1抗體
ALKB蛋白抗體
乙酰輔酶A酰基轉移酶1抗體
磷酸化β-肌動蛋白抗體
磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體
磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體
載脂蛋白D抗體
酸敏感離子通道1抗體
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)
髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體
腺苷酸環化酶1抗體
腺瘤樣息肉抗體
溶血磷脂酰基轉移酶抗體
錨蛋白重復及SAM結構域蛋白3抗體
磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
酰基輔酶A脫氫酶很長鏈抗體
信號轉導銜接結合蛋白抗體
錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
有絲分裂激酶B抗體
磷酸化Ack1抗體
磷酸化Ack1抗體
磷酸化β抑制蛋白1抗體
磷酸化有絲分裂激酶A抗體
磷酸化APS抗體
有絲分裂激酶A抗體
干擾素誘導蛋白AIM2抗體
水通道蛋白-2抗體
腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結合蛋白抗體
ADP核糖基化因子樣11抗體
ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體
ARM重復X連鎖蛋白ARMCX1抗體