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tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類)細抱凍存方案

發表時間:2021-06-23
 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類)細抱凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養細抱胞六存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具依細胞的產品說明書。

1.配制」存培養基,于2C至8°C下儲存,夏至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于用細系。

2凍存貼壁細抱胞,利用傳代時所月方法輕柔地使細胞從廷織培養容器上脫離下來。用該細抱所需完全培養基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍染法或普使用 Countess(⑤自動細計數儀測定總細態數和活細百分比。根據所需活細

4.以大約100-200X9的離心力將細胞暴液楽心5至10分鐘。在無條件下小心鑰持掉上清液,不要攪動細抱胞沉定。
注:心速度和時?取決于細種類

5.月預冷的凍存培養基重新暴浮細胞沉,將其調至該細抱適會的活細胞密度。凍細胞,使涅度每分鐘大約降低1C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存倉中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

NRK-52E,大鼠腎細胞
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293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系
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HUVEC-12, 人臍靜脈血管內皮細胞系
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LX-2, 人肝星形細胞株
3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞


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